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原位雜交-原位雜交檢測-貝科新肽(推薦商家)

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原位雜交技術(shù)(in situhybridization)是以標記的核酸分子為探針,在組織細胞原位檢測特異核酸分子的技術(shù)。使含有特異序列、經(jīng)過標記的核酸單鏈即探針,在適宜條件下與組織細胞中的互補核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交,再以自顯影或細胞化學(xué)方法對標記探針進行探測,從而在細胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。

可以檢測cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各種種屬的標本,包括哺乳動物、爬行動物、菌、植物標本。也可以檢測組織芯片。

①細胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位,植物原位雜交,可用于基因圖譜,熒光原位雜交,基因表達和基因組進化的研究;②組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位,如EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA的檢測;③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達及其變化的檢測;④基因在染色體上的定位;⑤檢測染色體的變化,原位雜交,如染色體數(shù)量異常和染色體易位等;⑥分裂間期細胞遺傳學(xué)的研究,如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定,某些的診斷和生物學(xué)劑量測定等。

同一樣本可以多次做原位雜交實驗嗎?

一般情況下,如果操作沒有得到理想的結(jié)果,是可以將探針洗滌然后進行再次的雜交的。如果使用的是直標型探針,原位雜交檢測,還可以使用不同探針對同一樣本進行反復(fù)雜交。針對不同的樣本,處理方法略有不同。

原位雜交實操中哪些因素比較重要?

重要的因素:溫度、光照、濕度和試劑的PH值。溫度和濕度直接影響著探針和目標DNA的雜交效率;光照影響著熒光染料的強度,所以探針要避光保存,其已經(jīng)雜交的片子可用防熒光淬火劑封片且避光保存;各種試劑pH也要達到要求,這也直接關(guān)系到原位雜交的穩(wěn)定性。

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