植物組織原位雜交技術(shù)在植物基因表達(dá)和調(diào)控研究中具有廣泛的應(yīng)用。它可以用來(lái)研究植物發(fā)育、生長(zhǎng)、逆境響應(yīng)等方面的基因表達(dá)模式和調(diào)控機(jī)制。例如,可以利用該技術(shù)研究植物中的轉(zhuǎn)錄因子、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、代謝途徑等基因的表達(dá)和調(diào)控。此外,植物組織原位雜交技術(shù)還可以用來(lái)鑒定植物中的病原體、檢測(cè)植物等方面。
總之植物組織原位雜交技術(shù)是一種重要的分子生物學(xué)技術(shù),可以用來(lái)研究植物基因的表達(dá)和調(diào)控。它具有操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠、應(yīng)用廣泛等優(yōu)點(diǎn),是植物分子生物學(xué)研究中不可或缺的工具。
原位雜交:
原位雜交是指用特定探針定位、檢測(cè)DNA、RNA的一種有效的實(shí)驗(yàn)方法,原位雜交檢測(cè),通過(guò)把特點(diǎn)序列客隆到特殊載體上,通過(guò)轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)一條天然的RNA探針,將探針和切片樣品進(jìn)行雜交,通過(guò)一系列顯色方法,來(lái)確定RNA或者DNA表達(dá)區(qū)域;本中心原位雜交探針采用的是第高辛和生物素標(biāo)記,靈敏度和同位素相當(dāng)。 我們采用roche標(biāo)記及顯色試劑盒,GISH/ISH/FISH按照探針進(jìn)行收費(fèi),每個(gè)試劑盒每條探針可以雜交60-80張玻片,收費(fèi)為1萬(wàn)5千元,湖北原位雜交,GISH雜交因需要加抗淬滅劑每條探針收費(fèi)為1萬(wàn)9千元。量大優(yōu)惠!
植物組織原位雜交的步驟包括以下幾個(gè)方面:
1. 制備組織樣品:從植物中取出需要研究的組織樣品,如根、莖、葉等。
2. 固定組織樣品:將組織樣品固定在載玻片上,原位雜交技術(shù),通常使用或乙醇等化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行固定。
3. 處理組織樣品:對(duì)固定的組織樣品進(jìn)行脫水、透明化、脫脂等處理,以便于DNA探針的穿透和結(jié)合。
4. 制備DNA探針:根據(jù)需要研究的基因序列,設(shè)計(jì)并合成DNA探針。DNA探針可以標(biāo)記熒光染料或性同位素,以便于檢測(cè)。
5. 雜交DNA探針:將DNA探針與組織樣品進(jìn)行雜交,通常需要在高溫下進(jìn)行,以便于DNA探針與RNA或DNA結(jié)合。
6. 檢測(cè)雜交信號(hào):通過(guò)熒光顯微鏡或計(jì)數(shù)器等設(shè)備,檢測(cè)DNA探針與RNA或DNA的結(jié)合情況,確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。
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