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主營(yíng)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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原位雜交第三天
1） 用1ml含10％熱滅清的MABT溶液置換溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時(shí)以上，后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。
2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置五分鐘。
3）將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul BM Purple AP Substrate(底物，用之前加5mM左旋米唑)，十六孔板外面包上錫箔紙以避光，避免搖動(dòng)，室溫下顯色。
4）每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開(kāi)始顯色
5）將顯色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加上4％多聚甲醛固定，拍照。
6）4C冰箱保存。
生物領(lǐng)域應(yīng)用原位雜交技術(shù)的例子：
物種進(jìn)化與系統(tǒng)發(fā)生學(xué)研究：在物種進(jìn)化與系統(tǒng)發(fā)生學(xué)研究中，原位雜交技術(shù)可以用于檢測(cè)物種之間的親緣關(guān)系和進(jìn)化歷程。例如，可以比較不同物種之間特定基因序列的差異，進(jìn)而研究它們的親緣關(guān)系和進(jìn)化歷程。
原位雜交技術(shù)在基因表達(dá)和調(diào)控、細(xì)胞分化與發(fā)育、研究和物種進(jìn)化與系統(tǒng)發(fā)生學(xué)等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，為深入探究生命現(xiàn)象、促進(jìn)生物技術(shù)的發(fā)展提供了有力的技術(shù)支持。
植物原位雜交除了在遺傳育種方面的應(yīng)用，還在其他領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用，包括：
植物基因研究：植物基因是一種利用基因工程技術(shù)來(lái)人類(lèi)遺傳疾病的方法。通過(guò)植物原位雜交技術(shù)，可以將人類(lèi)基因?qū)氲街参锛?xì)胞中，并在植物細(xì)胞中表達(dá)出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，為基因提供重要的物質(zhì)基礎(chǔ)。
植物抗性研究：植物原位雜交技術(shù)可以用于研究植物對(duì)環(huán)境脅迫的抗性機(jī)制，熒光原位雜交，例如抗旱、抗鹽、抗病等，有助于了解植物在環(huán)境脅迫下的生理和分子響應(yīng)機(jī)制。
植物比較研究：通過(guò)植物原位雜交技術(shù)可以比較不同植物之間基因表達(dá)模式的差異，從而為植物分類(lèi)和進(jìn)化研究提供重要的參考依據(jù)。
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第2年
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