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主營：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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植物組織原位雜交是一種重要的分子生物學技術(shù)，它可以用來研究植物基因的表達和調(diào)控。該技術(shù)利用DNA探針與目標組織中的RNA或DNA結(jié)合，從而確定目標基因的表達模式和位置。本文將介紹植物組織原位雜交的原理、步驟和應(yīng)用。
原理
植物組織原位雜交的原理是利用DNA探針與目標組織中的RNA或DNA結(jié)合，從而確定目標基因的表達模式和位置。DNA探針是一段已知序列的DNA分子，可以與目標RNA或DNA的互補序列結(jié)合。在組織原位雜交中，DNA探針通常標記有熒光染料或性同位素，以便于檢測。
原位雜交技術(shù)的實驗結(jié)果
原位雜交技術(shù)的實驗結(jié)果包括陽性信號和陰性信號的判斷標準。陽性信號是指探針與目標核酸序列特異性結(jié)合形成的雙鏈復合物，染色體原位雜交，在顯色反應(yīng)、熒光染色或性同位素標記下呈現(xiàn)出明顯的信號。陰性信號是指探針未與目標核酸序列結(jié)合，不呈現(xiàn)任何信號。實驗結(jié)果的分析需要結(jié)合探針的特異性和敏感性、組織或細胞的原始結(jié)構(gòu)以及實驗條件等因素綜合進行。
預雜交
1）每個管中置換成大約300ulHYB－溶液，60℃水浴5分鐘，避免振蕩。
2）用等體積的HYB＋取代HYB－。
3）60℃水浴，預雜交4小時以上。
雜交
1）吸去預雜交的HYB＋，加上100ul已加入探針的HYB＋溶液（探針濃度約為1ng/ul）..
2）60℃ 溫浴過夜。
注：雜交與預雜交的溫度可以是55到60度不等，溫度越低，探針結(jié)合越好，溫度越高，背景越小。
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第2年
